在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中，標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)條件是至關(guān)重要的。對(duì)于貼壁和懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，可以使用1640培養(yǎng)基（含10%胎牛血清和1%青霉素-鏈霉素混合液），并將培養(yǎng)溫度設(shè)置為37℃以確保細(xì)胞能夠良好生長(zhǎng)。
傳代方法
對(duì)于細(xì)胞的第一次傳代，建議以1:2的比例進(jìn)行。若細(xì)胞匯合度未超過(guò)80%，需將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至離心管，并保留5ml完全培養(yǎng)基放回37℃、5% CO2的孵箱中培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超過(guò)80%，則可直接進(jìn)行傳代。
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
俄羅斯專享會(huì)294強(qiáng)調(diào)，在處理細(xì)胞時(shí)，保持良好的無(wú)菌操作非常重要。收到細(xì)胞后，應(yīng)使用75%的酒精對(duì)細(xì)胞瓶外進(jìn)行消毒，隨后在超凈臺(tái)下將細(xì)胞移入37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)，以使細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境。
在培養(yǎng)和觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)時(shí)，建議拍照記錄不同倍數(shù)的顯微鏡圖像（40x, 100x, 200x），尤其是在前三天的照片將作為售后服務(wù)的重要依據(jù)。如未提供照片，默認(rèn)為收到的狀態(tài)良好。
細(xì)胞傳代步驟
貼壁細(xì)胞的傳代
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂的PBS清洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml，放入37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，觀察細(xì)胞變化。若細(xì)胞大部分變圓后迅速移回操作臺(tái)，輕敲培養(yǎng)瓶并加入5ml完全培養(yǎng)基以終止消化。
3. 吸出溶液，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000RPM離心5分鐘，棄去上清液，再補(bǔ)加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例分瓶傳代，加入新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃、5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
懸浮細(xì)胞的傳代
1. 進(jìn)行半換液法，豎著將培養(yǎng)瓶在培養(yǎng)箱靜置1小時(shí)，輕吸去3ml培養(yǎng)基，然后補(bǔ)充3ml的完全培養(yǎng)基。
2. 可直接在傳代時(shí)加入500ul FBS以維持細(xì)胞活力。
3. 通常在傳代3次后進(jìn)行離心以去除死細(xì)胞。
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
在細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶80%的面積時(shí)，采用PBS清洗，添加胰蛋白酶消化液后，觀察細(xì)胞狀態(tài)，隨后移至含有無(wú)血清凍存液的試管中，攪拌均勻后轉(zhuǎn)存至凍存管。
俄羅斯專享會(huì)294建議將凍存細(xì)胞放在-80℃冰箱中以保持穩(wěn)定，存放24小時(shí)后可轉(zhuǎn)入液氮罐中以便長(zhǎng)期保存。
在細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，從液氮中取出凍存管，快速解凍后轉(zhuǎn)移至含5ml完全培養(yǎng)基的離心管中，離心并重懸后接種至培養(yǎng)瓶中。第二天需換新鮮的完全培養(yǎng)基以維持細(xì)胞健康。
總結(jié)
細(xì)胞培養(yǎng)是現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)研究的基礎(chǔ)，俄羅斯專享會(huì)294致力于為科研人員提供優(yōu)質(zhì)的細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品和服務(wù)，并確保在每一步過(guò)程中遵循嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)以保證細(xì)胞的高效生長(zhǎng)和存活。
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