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背景回顧 費(fèi)城兒童醫(yī)院于2019年引進(jìn)了首臺(tái)Cytek? Aurora?全光譜流式分析儀，經(jīng)過五年的累積，先后購買了多臺(tái)Cytek Aurora全光譜流式分析儀以及AuroraCS全光譜流式分選儀。迄今為止，實(shí)驗(yàn)室已建成3臺(tái)全光譜流式分析儀與2臺(tái)全光譜流式分選儀，儀器的使用頻率極高，短短幾年內(nèi)便取得了豐碩成果，發(fā)表了數(shù)量眾多的全光譜流式細(xì)胞儀高影響力文章。僅在2024年，這一年便連續(xù)發(fā)表了六篇影響因子都超過10的全光譜流式分選相關(guān)論文。以下選取其中三篇進(jìn)行深度解讀與賞析。一、揭秘肺部損傷后的再生機(jī)制（IF：448） 在肺泡中，包含了多種類型的細(xì)胞，如上皮細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。在嚴(yán)重的肺部損傷情況下，可能會(huì)出現(xiàn)異常修復(fù)過程。研究發(fā)現(xiàn)，來自氣道的krt5+基底細(xì)胞會(huì)遷移并增殖，侵入受損的肺泡區(qū)域，與Pdgfrb+間充質(zhì)細(xì)胞共同形成損傷誘導(dǎo)的組織生態(tài)位。這一過程使得氣道基底干細(xì)胞與肺泡II型干細(xì)胞在修復(fù)過程中產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)。該研究利用Cytek AuroraCS全光譜分選型流式細(xì)胞儀，成功分選出tdTomato+Pdgfra/Pdgfrb間充質(zhì)細(xì)胞、CD31+內(nèi)皮細(xì)胞、CD326+間充質(zhì)細(xì)胞以及CD45+免疫細(xì)胞，并結(jié)合單細(xì)胞測(cè)序平臺(tái)，揭示損傷誘導(dǎo)的組織生態(tài)位由間充質(zhì)細(xì)胞增殖與Notch信號(hào)通路所調(diào)控，從而為臨床治療提供了新的靶點(diǎn)參考。此外，通過分選tdTomato+AT2（肺泡II型）細(xì)胞與YFP+Pdgfra+細(xì)胞并在體外培養(yǎng)為小鼠肺泡類器官，充分展現(xiàn)了全光譜流式分選儀的卓越性能。二、首次發(fā)現(xiàn)NF-κB信號(hào)與X染色體失活的相關(guān)性（IF：178） X染色體失活（XCI）是女性細(xì)胞通過抑制X連鎖基因表達(dá)來平衡性別基因劑量的過程。本研究發(fā)現(xiàn)在小鼠及人類T細(xì)胞中，XCI的維持受T細(xì)胞受體活化與下游NF-κB信號(hào)通路的調(diào)控。抑制NF-κB會(huì)阻止X染色體失活特異性轉(zhuǎn)錄本（Xist）RNA的重新定位，并影響組蛋白對(duì)失活X染色體的修飾。研究團(tuán)隊(duì)設(shè)計(jì)了15色方案，使用5激光Cytek AuroraCS全光譜分選型流式細(xì)胞儀對(duì)女性健康供者及NF-κB1突變患者的中央/效應(yīng)記憶CD4+及CD8+T細(xì)胞進(jìn)行分選。分選后的T細(xì)胞經(jīng)刺激培養(yǎng)后，通過熒光顯微鏡平臺(tái)檢測(cè)XistRNA熒光原位雜交（FISH）及失活X染色體的組蛋白修飾定位，展示了Cytek AuroraCS全光譜分選型流式細(xì)胞儀在高維實(shí)驗(yàn)中的卓越分辨能力，其兼容多種新型熒光染料及其他傳統(tǒng)方案，保留極大的擴(kuò)展空間。三、NAD水平預(yù)測(cè)淋巴細(xì)胞克隆性擴(kuò)增的動(dòng)態(tài)變化（IF：178） 適應(yīng)性免疫反應(yīng)需要從異質(zhì)性細(xì)胞庫中擴(kuò)增高親和力的淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞的活化伴隨著轉(zhuǎn)錄與代謝的變化，進(jìn)而產(chǎn)生成與抗原親和力相關(guān)的細(xì)胞分裂。然而，哪種代謝物控制親和力驅(qū)動(dòng)的淋巴細(xì)胞增殖過程尚不明確。本研究發(fā)現(xiàn)，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）在T細(xì)胞受體親和力依賴的代謝重編程中扮演關(guān)鍵角色，NAD水平能夠預(yù)測(cè)T細(xì)胞結(jié)束休眠的時(shí)間及其增殖能力。研究人員使用Cytek AuroraCS全光譜分選型流式細(xì)胞儀，在37℃的溫控條件下保持進(jìn)樣倉和分選倉的溫度，通過自發(fā)熒光識(shí)別功能將小鼠CD8+T細(xì)胞的NAD(P)H自發(fā)熒光區(qū)分為不同水平，為細(xì)胞培養(yǎng)與增殖狀態(tài)的檢測(cè)提供了有力證據(jù)。總結(jié)展望 Cytek AuroraCS全光譜分選型流式細(xì)胞儀，作為全球首個(gè)石英杯激發(fā)的全光譜流式分選平臺(tái)，結(jié)合Cytek旗下專利的全光譜分析（FSP?）與高性能分選技術(shù)，提供了卓越的靈敏度、分辨率和前所未有的靈活性。它為感染性疾病、腫瘤免疫、微生物學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、炎性疾病及發(fā)育生物學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域的發(fā)展奠定了高水平的研究平臺(tái)。