細胞增殖是生命科學的重要基礎過程，而CFSE檢測則成為研究這一過程的有效工具。然而，實驗中可能會遇到諸多挑戰，影響結果的準確性。今天，我們將深入探討CFSE檢測的基本原理，以及在實驗過程中常見問題及其解決方案，從而提升您的實驗成功率，助力您的研究進展！
CFSE實驗簡介
CFDA?SE是一種具有膜通透性的熒光染料。當其穿過細胞膜進入活細胞后，會被胞漿中的酯酶催化轉化為羧基熒光素琥珀酰亞胺（CFSE）。CFSE能夠發出強烈的綠色熒光，且不能再次穿透細胞膜，能夠有效保留在胞內。此外，CFSE還能夠自發且不可逆地與細胞內蛋白氨基結合，從而偶聯于這些蛋白上。未結合的多余CFSE則通過被動擴散回到細胞外培養基，并在后續的清洗步驟中被去除。
在細胞分裂過程中，CFDASE的熒光穩定且均勻分布，隨著細胞分裂，其熒光強度會逐漸遞減，從而可通過流式細胞儀檢測到不同增殖階段的細胞，例如未分裂的細胞、分裂一次（1/2的熒光強度）、分裂兩次（1/4的熒光強度）、分裂三次（1/8的熒光強度）等。這是CFSE檢測的正常結果。在此，我們需要關注一些重要參數：
- Parents、Generation2-8：代表親代細胞及各子代在總細胞中的比例。
- Proliferation Index：增殖指數，反映細胞刺激后增殖的強度。
- Precursor Frequency：前體頻率，表示發生細胞增殖的細胞占總細胞的比例。
CFSE實驗異常情況分析
在CFSE檢測中，可能會遇到的異常情況包括：
- 染色后立刻出現雙峰現象
- 未檢測到細胞增殖
- 熒光信號超出檢測范圍
- 親本峰向左移動
以上是CFSE檢測中常見問題的總結分析，希望能幫助您在實驗過程中迅速定位并解決難題。若您希望獲取更多關于細胞功能檢測的實用信息，歡迎關注俄羅斯專享會294的細胞功能專欄，我們將為您提供持續的支持與更新。
津公網安備 12011302120117